荧光分光光度计的基本结构与原理

荧光分光光度计的基本结构与原理

        荧光分光光度计是一种用于扫描液相荧光标记物发出的荧光光谱的仪器。它可以提供激发光谱、发射光谱、荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等多项物理参数，从各个角度反映分子的键合和结构。通过测量这些参数，不仅可以进行一般的定量分析，还可以推断分子在各种环境中的构象变化，从而阐明分子结构和功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般为190~650nm，发射波长扫描范围为200~800nm。可用于凝胶条等液体和固体样品的光谱扫描。
        基本结构和原理
        高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光通过滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发射荧光。荧光经过过滤和反射后，由光电倍增管接受，然后以图形或数字的形式显示出来。
        基本结构及原理，光源与探测器成直角排列。
         1、光源：
        高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发出高强度的连续光谱，在300nm～400nm范围内强度几乎相等，故较常用。
         2、激发单色仪：
        放置在光源和样品室之间的激发单色器或*单色器用于滤除特定的激发光谱。
         3、发射单色器：
        发射单色仪或第二单色仪置于样品室和检测器之间，单色仪常采用光栅。过滤掉特定的发射光谱。
         4、探测器：
        通常，光电管或光电倍增管用作检测器。光信号可以被放大并转换成电信号。
         5. 样品室：
        由石英池（用于液体样品）或固体样品架（用于粉末或薄片样品）组成。测量液体时，光源与检测器成直角布置；测量固体时，光源与检测器呈锐角排列。