如何选择倒置显微镜与荧光显微镜?
如何选择倒置显微镜与荧光显微镜?
显微镜是细胞培养及相关衍生实验的重要仪器。目前市面上的显微镜种类繁多,选择一款符合自己需求且适合的显微镜是一个挑战。下面介绍倒置显微镜和荧光显微镜的原理,为您提供方便。
倒置显微镜的组成与普通显微镜相同,主要包括机械部分、照明部分、光学部分三部分。倒置显微镜的组成与普通正置显微镜相同,只是物镜和照明系统倒置,前者在台下,后者在台上。这种结构使聚光系统与载物台的有效距离显着扩大,便于放置培养皿、细胞培养瓶(当然是玻片等)等较厚的待观察物体,并且在同时物镜和材料之间的工作距离不必很大。倒置显微镜用于医疗卫生单位、大专院校、科研院所的微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮液、沉淀物等的观察。它可以连续观察培养基中细胞和细菌的繁殖和分裂过程,并且可以对这个过程的任何形式进行拍照。广泛应用于细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、基因工程、工业微生物学、植物学等领域。
荧光显微镜用于研究化学物质在细胞中的吸收、运输、分布和定位。对于被检物体,产生荧光的方式有两种:自体荧光,紫外线照射后直接发出荧光;二次荧光,将被观察物体用荧光染料处理后,再用紫外光照射后发出荧光。细胞中的一些物质,如叶绿素,在受到紫外线照射后会产生自发荧光;虽然有些物质本身不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色,在受到紫外线照射后也能发出二次荧光。荧光显微镜采用发光效率高的点光源,通过彩色滤光片系统发出一定波长的光(紫外光365nm或紫蓝光420nm)作为激发光,激发标本中的荧光物质发射各种颜色的荧光,然后通过放大物镜和目镜观察。这样,在强烈反差的背景下,即使是荧光光线非常微弱,易于识别,灵敏度高。主要用于细胞结构和功能及化学成分的研究。
荧光显微镜分为透射型和外延型两种,前者更原始,后者更。两种荧光显微镜的基本结构相似,主要区别在于:透射激发光穿过标本,标本整体产生荧光,荧光再次进入物镜。放大倍数越高,荧光越弱; Epi型激发光投射在试样表面,试样表面产生荧光,荧光进入物镜。放大倍数越高,荧光越强,适合高倍观察。荧光显微镜的主要部件有汞光源、激发滤光片、二向色镜(外反射式)、加压滤光片、暗场聚光镜(透射式)等。另外,由于汞发热严重灯,其中大多数还配备了吸热过滤器。一些荧光显微镜还具有相差物镜和环形光阑,因此可以进行相差观察。还有带倒置镜架的荧光显微镜、倒置显微镜等。
此外,上述显微镜可以通过安装CCD组装成数码显微镜,CCD将显微镜看到的物理图像通过数模转换,使其在计算机上成像。因此,我们可以通过显示器再现传统普通双目观察对微观领域的研究,从而提高工作效率。
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